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RNA及siRNA合成


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常見問題

RNA合成報告說明事項


siRNA and Control
普通siRNA Oligo Duplex
化學修飾siRNA Oligo Duplex
siRNA陰性對照
常用的siRNA陽性對照
螢光標記siRNA Oligo Duplex
RNAi超值套餐
單股RNA Oligo
miRNA (MicroRNA)合成
‧新手套件(Starter Kit)Coming Soon!
‧RNAi干擾載體Coming Soon!

siRNA and Control

化學合成siRNA有操作簡便、轉染效率高、對細胞的或者組織的毒性小、可大規模制備等優點。特別適用在目標基因位置不確定情況下對有效siRNA片段進行篩選。

MDBio siRNA產品特性

品質管制 於嚴格控制的流程和條件下合成,符合ISO9000品質標準,產品經過紫外光度計精確定量。
純化方式 以HPLC純化,全長雙鏈siRNA含量>97%。
標記與修飾 在3'和5'端標記生物素(Biotin)、螢光與磷酸根,以便於監測siRNA對特定基因表達的抑制效果。
長度 19至23鹼基/鏈
產品形式 單鏈RNA凍乾粉末;已黏合的雙鏈RNA凍乾粉末。
儲存與穩定性 保存於-20℃,並避免反覆凍融。在此條件下,RNA的穩定性可達6個月。螢光標記的RNA必須避光保存。
隨貨資料 包括名稱、序列、濃度、交貨OD值、精確莫爾數與純化方式。
序列設計 提供免費設計服務
包裝與運送 以1.5mL微量離心管包裝,採室溫運送,收到後請置於-20℃。

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普通siRNA Oligo Duplex $$價格查詢$$

生工公司普通siRNA Oligo均經HPLC純化,100%去除尚未配對的單鏈RNA Oligo。您只需以隨附的通用緩衝液回溶,即可使用本公司的RNAi轉染試劑進行後續實驗。

生工小幫手:

1OD260的雙股RNA Oligo Duplex約為40ug。
21鹼基對的雙股siRNA Oligo Duplex平均分子量約為13300。

您可以下列速算公式估算雙股siRNA Oligo Duplex之莫爾數:
1OD260 ≒ 40 ug ≒ 3.0 nmole

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化學修飾siRNA Oligo Duplex(Stable siRNA Oligo Duplex) $$價格查詢$$

2'-F-rU 2'-F-rC

RNAi技術的最大難題就是化學合成siRNA的穩定性問題,生工公司化學修飾siRNA係將U與C鹼基二號碳上之氫氧基(-OH)以氟原子(F)取代 ,結構如上。

生工公司化學修飾siRNA解決您RNAi的難題。給您:
‧高效率的基因抑制
‧更長的作用時間
‧高穩定性
‧低副作用

現存問題 普通siRNA 生工公司化學修飾siRNA
siRNA Degradation 普通的非修飾siRNA在細胞培養過程中很容易降解,雖然在大部分的體外實驗中有效,但是在細胞培養中壽命較短。 化學修飾siRNA不僅延長了在血清和細胞培養中的壽命,並且加強了在體外實驗中的應用能力
Long Lasting Effect 作用時間較短,一般情況下為一周左右。 化學修飾siRNA作用時間長,比普通siRNA的作用時間延長一倍左右。
In vivo Activity 普通siRNA穩定性較差,一般不適用於體內實驗。 化學修飾siRNA在體內的穩定性佳。


生工小幫手:

1OD260的雙股RNA Oligo Duplex約為40ug。
21鹼基對的雙股siRNA Oligo Duplex平均分子量約為13300。

您可以下列速算公式估算雙股siRNA Oligo Duplex之莫爾數:
1OD260 ≒ 40 ug ≒ 3.0 nmole

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siRNA陰性對照

想要正確分析RNAi實驗數據必須有合適的對照實驗。與哺乳動物基因無同源性並帶有螢光標記的陰性對照siRNA有利於轉染條件的優化,並可以作為非特異性基因抑制作用的對照。

一個完整的siRNA實驗應該有陰性對照。在siRNA初篩階段,您可以選擇生工公司備有現貨的siRNA陰性對照,但請務必確認此陰性對照與您要研究的目標基因間無序列同源性。當進一步做基因功能的研究時,siRNA陰性對照應與實驗組的siRNA有相同鹼基的組成,但是與mRNA沒有明顯的序列同源性。通常的做法是將實驗組的siRNA序列打亂,並確認結果與實驗用細胞中的其它基因沒有同源性。

.普通陰性對照(5860029551): 與哺乳動物基因無同源性,適於作為一般實驗的陰性對照。

.螢光標記(FAM)陰性對照(5860029552): 與哺乳動物基因無同源性,除作為實驗的陰性對照外,利用螢光標記,可以方便地在螢光顯微鏡下觀察轉染的效率,有利於優化轉染條件。螢光容易拍攝,並有很好的pH耐受性,在活細胞中也更加穩定。

.化學修飾陰性對照(5860029553): 與哺乳動物基因無同源性,長效實驗的第一選擇。

產品
代碼
產品
說明
規格 純化
方式
價格 交貨
期限
5860029551 Negative Control siRNA Oligo Duplex
5'-UUCUCCGAACGUGUCACGUTT-3'
1OD HPLC 945元 現貨
5860029552 FAM Labeled
Negative Control siRNA Oligo Duplex
5'-UUCUCCGAACGUGUCACGUTT-3'
2x0.5OD 1,680元
5860029553 Chemically Modified Negative Control siRNA Oligo Duplex
5'-UUCUCCGAACGUGUCACGUTT-3'
1OD 1,470元

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常用的siRNA陽性對照

陽性對照是很重要的實驗系統檢查。當您看到siRNA陽性對照的預期實驗結果時,您才能確保在您的實驗體系中,轉染、RNA萃取與檢測方法都可靠無虞。生工為您準備了下列的看家基因(Housekeeping Gene)陽性對照供您選擇。

產品代碼 產品說明 交貨總量 價格
5860029554 LaminA/C 1OD 1680元
5860029555 GFP22
5860029556 Luciferase GL2
5860029557 MAPK1
5860029558 Human Beta-Actin
5860029559 Vimentin
5860029560 P53
5860029561 GAPDH
5860029563 Mouse Beta-Actin

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螢光標記siRNA Oligo Duplex $$價格查詢$$

siRNA兩股的4個末端可進行多種標記物標記。標記後的siRNA可以流式細胞儀、螢光顯微鏡、雷射共軛顯微鏡等觀察,以確定是否有效轉染及優化轉染條件。標記的siRNA還可用於siRNA細胞內定位及雙標記實驗(配合標記抗體)來追蹤轉染過程中成功轉染了siRNA的細胞,並觀察轉染效果與目標蛋白表達的抑制作用間之關連性。

反義股5'端標記會影響其基因抑制作用,所以不推薦在這一位點進行標記。在其他三個末端修飾對基因抑制作用幾乎沒有影響。生工為您在正義股的5'端修飾,目前這是公認最佳的化學標記位點。5'螢光標記的siRNA有助於直接觀察siRNA的轉染效率


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單股RNA Oligo $$價格查詢$$

生工小幫手:

1OD260的單股RNA Oligo約為33ug。
每一鹼基平均分子量約為330。

您可以以下速算公式估算單股RNA Oligo之莫爾數:
1OD260 ≒ (100/N) nmole
其中,N為RNA Oligo之長度

例如:1OD260之20鹼基RNA Oligo約為5 nmole

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miRNA(MicroRNA)合成 $$價格查詢$$

MicroRNA (miRNA) 是近幾年在真核生物中發現的一類具有調控功能的非編碼RNA,為19至24鹼基的小片段單股RNA,它們主要參與基因轉錄後的調控。lin-4 、let-7 是最早發現的約22鹼基的RNA,為線蟲(Caenorhabditis elegans)中控制發育時序的基因,不編碼蛋白質。隨後在線蟲、果蠅(Drosophila melanogaster)、人的細胞中選殖出了類似的微小RNA 。這些19至25鹼基的RNA,包括lin-4 、let-7 被稱為microRNA。miRNA 的調控功能十分重要,近來發現它們在果蠅的細胞增殖、死亡及脂肪代謝,線蟲極性的形成,哺乳動物造血幹細胞的分化等過程中均有重要的調控作用。在植物中,miRNA 還參與了葉子與花的發育過程。動物(尤其是人) miRNA 的生物合成過程已有初步輪廓。首先,miRNA 基因的初級轉錄產物(pri-miRNA) 在細胞核中被RNaseⅢ Drosha 切割成為前體miRNA(pre-miRNA),在初次剪切後,pre-miRNA在轉運蛋白exportin-5的作用下由細胞核內被送到細胞質中,然後由另一種RNaseⅢ Dicer進一步切割產生成熟的miRNA。這些成熟的miRNA與其他蛋白質一起組成RISC(RNA-Induced Silencing Complex)複合體,從而引起目標mRNA的降解或者轉譯抑制。

如蒙訂購,敬請您先至Sanger miRNA資料庫查詢確認您需要的miRNA後,再將該miRNA的序列提供給我們安排合成。


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