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常見問題

  • 如何檢測引子的純度?
  • 實驗室最方便的作法是以聚丙烯醯胺凝膠電泳(PAGE)檢測:使用加有7M尿素的16%聚丙烯醯胺凝膠進行電泳。

    請取0.2-0.5OD的引子,以尿素飽和液溶解或在引子溶液中加入乾燥尿素直到飽和為止,並於電泳上樣前先加熱變性(95度,2分鐘)。加入尿素的目的,一是變性,二是增加樣品比重,容易上樣。

    隨後以600V電壓進行電泳,一定時間後(約2-3小時),即可打開玻璃板,以螢光TLC片在紫外光燈下檢測。如在主條帶之下沒有雜帶,即可證明純度沒有問題。(變性不充分時,主條帶之上可能會有其他條帶,此為引子二級結構條帶,變性完全時即消失。)