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常規耐熱性核酸聚合脢

Taq DNA Polymerase

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3. 1Kb DNA Ladder Marker一支 (50ug,100次,原價1,000元)
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產品資料

產品代碼: 101-9012-90-2
簡介: Taq耐熱性核酸聚合脢主要用於對準確度要求不高的PCR擴增實驗,也是許多PCR檢測試劑組的主要成分。Taq核酸聚合脢由5'向3'端合成DNA,具有很強的DNA聚合能力,擁有已知耐熱性核酸聚合脢中最高的DNA延伸速度。Taq核酸聚合脢無3'至5'端外切脢活性,因此在PCR擴增時沒有校正功能。
濃度: 5U/uL
錯誤率: 10-5
10X反應液: 100mM KCl
80mM (NH4)2SO4
100mM Tris-HCl(pH9.0)
0.5% NP-40
20mM MgSO4
註:不含鎂離子反應液無此成分
鎂離子溶液: 25mM MgCl2
品質管制:
1. 無外來核酸脢活性。
2. SDS-PAGE純度大於95%。
3. 以PCR方法檢測無外來DNA。
4. 能自50ng的Lambda模板中特異性擴增出1Kb及2.2Kb之單套(Single Copy)基因。
保存條件: -20℃
參考資料: Taq核酸聚合脢來源為高溫嗜熱菌Thermus aquaticus,分子量為94KD。PCR產物3'端帶有A鹼基突出。Taq核酸聚合脢無3'端向5'端之外切脢活性(故無錯誤校正功能)。聚合時延伸速度為每分鐘大於1200鹼基,最佳溫度為65-75℃,dNTP工作濃度為100-300uM,最佳Mg2+濃度為1.5-3.0mM,最佳pH為8.1-9.2。
使用方法: 50uL標準PCR擴增反應體系中約需Taq核酸聚合脢2.5U左右,模板10ng-500ng,其他參數設定請參考上列參考資料。
注意事項: 除了聚合脢活性喪失之外,下列因素也可能導致PCR擴增實驗失敗,請留意。
1. 模板DNA太多或太少。
2. 反應體系中含有鎂離子螯合劑或dNTP過量,導致鎂離子實際濃度過低。
3. PCR儀溫度不準確。
4. 樣品中含有未知的Taq核酸聚合脢抑制劑。
5. 引子或dNTP部分降解。
6. Taq核酸聚合脢用量過多。

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中華民國97年10月03日更新