檔案名稱:siRNA_doc.htm

RNA合成報告說明事項


1. RNA Oligo是以OD260為計量單位,在1mL廣程標準比色皿中、260nm波長下,1mL吸光度為1的溶液中所含的RNA Oligo總量定義為一OD260單位。根據此定義,一OD260約等於40ug的RNA Oligo,您可根據此資料和您的RNA Oligo分子量進行莫爾數以及回溶濃度的計算。
2. 雙股siRNA的平均分子量為13,300。
3. 雙股siRNA的OD260、莫爾數和質量間雖有精確公式可以計算,但一般情況下,21鹼基對的雙股siRNA可以以下簡單公式估算:
1OD=3nmol=40ug 
4. 如希望將1OD的雙股siRNA回溶為濃度20uM的溶液,應該以多少體積的緩衝液進行回溶?1OD的雙股siRNA應使用150uL緩衝液回溶。如需較高濃度溶液或雙股siRNA總量較多,您可以依此比例減少或增加回溶緩衝液的體積。
5. 由於抽乾後之RNA Oligo為附著於管壁上的極輕薄膜,開蓋時極易逸失,開蓋前請先離心,再緩慢打開管蓋。溶解時,請加足量DEPC水後蓋上管蓋,振盪溶解。
6. 建議您將RNA Oligo儲存在-20°C的環境中,避免多次反覆凍融。在前述條件下,RNA oligo可穩定保存達6個月。
7. 螢光修飾的RNA Oligo因對光敏感,必須避光保存。
8. 雙鏈siRNA正股21鹼基為目標序列的19個鹼基,並於3'端加上2個突出的TT鹼基;反股21鹼基則完全與目標序列互補。

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